TSKgel Protein C4-300 色譜柱專為生物大分子的高分辨率、高回收率分離而設(shè)計(jì)，適合用來(lái)分析重組蛋白、抗體片段或者 PEG 蛋白等樣品。

TSKgel Protein C4-300 色譜柱的孔徑為 30nm，非常適合用來(lái)分離蛋白質(zhì)。粒徑 3μm 優(yōu)化配體密度和烷基長(zhǎng)度，使蛋白、多肽樣品的回收率大大優(yōu)于其它品牌的 C4 反相色譜柱。

C4 短鏈烷基官能團(tuán)及其控制的結(jié)合密度提供適度疏水性的固定相，使得對(duì)蛋白質(zhì)的分析有更高的回收率和更少的峰拖尾。300? 的大孔徑保證大分子可以進(jìn)入孔內(nèi)部，較 100? 孔徑的反相柱有更高的峰值容量。

規(guī)格參數(shù)：

標(biāo)準(zhǔn)蛋白的分析

圖 1 比較了 TSKgel Protein C4-300 色譜柱和其他市售品牌的 3.5μm 的 C4 反相色譜柱對(duì)標(biāo)準(zhǔn)蛋白樣品的分離結(jié)果。TSKgel Protein C4-300 能夠使細(xì)胞色素 C 和溶菌酶的分離度達(dá)到24.8，而其他市售品牌的 C4 色譜柱對(duì)這兩者的分離度僅為18.6。

并且，從圖中可以看到 TSKgel Protein C4-300 對(duì) BSA(峰3) 顯示出較高的理論塔板數(shù)和較少的峰拖尾，對(duì)小峰有很好的分離度。

抗體片段的分析

圖 2A & 2B 顯示了對(duì)抗體片段的分析譜圖。首先通過(guò)木蛋白酶對(duì)單克隆抗體人 lgG1 消化后，使用 SEC 色譜柱 TSKgel G3000SWXL 將抗體片段，wan全消化的抗體片段分離出來(lái)，獲得分子量不同的兩個(gè)組分 Fc(Fr.1) 和 Fab(Fr.2)。

然后使用 TSKgel Protein C4-300 色譜柱分別對(duì)這兩個(gè)組分進(jìn)行分析。從圖 3B 中可以觀察到，F(xiàn)c 和 Fab 每個(gè)組分中都分離出好幾個(gè)峰，這表明在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中使用的抗體樣品中含有疏水性不同的異構(gòu)體。

縮短蛋白分析時(shí)間

圖 3 是蛋白樣品的快速分析譜圖。如果使用 5cm 規(guī)格的 TSKgel Protein C4-300 短柱可以縮短 80% 的分析時(shí)間，流速可提高到 3mL/min。背壓低于 15MPa，可在常視 HPLC 系統(tǒng)中使用。在 40℃，流動(dòng)相為 30% 乙腈，0.2%TFA 條件下測(cè)試 C4 官能團(tuán)在酸性溶液中的穩(wěn)定性。并且在該分析條件下，運(yùn)行1000小時(shí)后色譜柱的理論塔板數(shù)沒(méi)有變化。標(biāo)準(zhǔn)蛋白的保留時(shí)間與初始值相比并沒(méi)有顯著損失。

圖3：蛋白樣品的快速分析

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粒徑：3μm